<page>
    <title>Bleu de Coomassie</title>
    <id>1237644</id>
    <revision>
      <id>20050712</id>
      <timestamp>2007-08-25T15:08:06Z</timestamp>
      <contributor>
        <username>Loveless</username>
        <id>41312</id>
      </contributor>
      <minor />
      <comment>robot  Ajoute: [[ja:クマシーブリリアントブルー]]</comment>
      <text xml:space="preserve">[[Image:Coomassie.png|thumb|right|200px|Structure du bleu de Coomassie]]
[[Image:Coomassie solution.jpg|thumb|left|200px|Solution de bleu de Coomassie]]
Le '''bleu de Coomassie''' (également appelé '''Brilliant Blue''', '''Brilliant Blue G''', '''Acid Blue 90''', '''C.I. 42655''', ou '''Brilliant Blue G 250''') est un colorant bleu communément employé en [[électrophorèse sur gel de polyacrylamide]] avec [[Laurylsulfate de sodium|sodium dodécyl sulfate]] ([[SDS-PAGE]]). Le gel est trempé dans le colorant pendant 30 minutes, avant d'en être débarrassé trente minutes ou davantage. Ceci permet la visualisation de bandes, indicant la teneur en [[protéines]] du gel. La visualisation du gel contient habituellement un &quot;marqueur&quot;, qui contient des protéines de poids moléculaire connu, ce qui permet d'évaluer le poids moléculaire des  protéines de la solution ou du tissu à tester.

==Usage en laboratoire==
Le bleu de Coomassie se lie supposément aux protéines via [[physisorption]] aux acides aminés basiques (principalement l'arginine) et aux aromatiques. Le bleu de Coomassie est un constituant intégral de la [[méthode de Bradford]], permettant de déterminer la concentration en protéines d'une solution, pour autant qu'on connaisse la séquence de ses acides aminés. Cette méthode est basée sur les propriétés physico-chimiques du bleu de Coomassie, une solution acide dont l'absorbance initiale de 465 nm devient de 595 nm lorsqu'elle est liée aux protéines. Les données d'absorbance peuvent être utilisées avec la [[loi de Beer]] afin de déterminer la concentration en protéines ainsi que leur taux dans une solution donnée. 

===Formule des solutions de teinte et lavage ===
====''Solution de teinte:''====
:2.5 g de bleu de Coomassie ,
:455 ml de [[méthanol]],
:455 ml d'eau distillée et désionisée (ddH&lt;small&gt;2&lt;/small&gt;O),
:90 ml d'[[acide acétique|acide acétique glacial]] (GAA)

(l'éthanol remplace avantageusement le méthanol car beaucoup moins toxique)

====''Solution de lavage (décoloration):''====
:455 ml de méthanol,
:455 ml de ddH&lt;small&gt;2&lt;/small&gt;O,
:90 ml de GAA

(bien que le lavage puise être effectué à l'eau, en chauffant)

Une solution éthanol 10% acide acétique 10% est très efficace surtout chauffée (passage au four à micro-ondes de quelques minutes) et bien moins toxique que le méthanol.

=== Formule classique du réactif de Bradford ===
:0.01% de bleu de Coomassie,
:4.7% d'[[éthanol]],
:8.5% d'acide phosphorique, ''in'' ddH&lt;small&gt;2&lt;/small&gt;O.

==Nom==

Comme pour beaucoup de colorants, le bleu de Coomassie tient son nom de la localité africaine de [[Kumasi]], actuellement dans le territoire du [[Ghana]]; il était développé comme teinture pour laine acide, et fut nommé en commémoration de l'occupation britannique de la capitale d'[[Ashanti]] en 1896, alors appelée Coomassie.[http://biochem.unl.edu/Faculty/ragsdale/biochem933_2002/Lectures/Lecture1/Lecture1.html]

==Liens externes==
* [http://biologicalworld.com/coomassie.htm Coomassie Blue Staining of SDS-PAGE - Recipes and Protocol]
* [http://www.westernblotting.org/coomassie.html Coomassie Blue: ingredients and procedure]
* [http://www.anaspec.com/search/?searchString1=brilliant+blue&amp;exact=1&amp;searchOption1=7 Coomassie Blue-commercial source]

[[Catégorie:Biologie moléculaire]]
[[Catégorie:Colorant]]

[[cs:Coomassie]]
[[de:Coomassie-Brillant-Blau]]
[[en:Coomassie]]
[[ja:クマシーブリリアントブルー]]
[[tr:Coomassie]]</text>
    </revision>
  </page>