Gram positif 223207 31283174 2008-07-04T03:21:09Z Zorrobot 179160 robot Modifie: [[eo:Gram-pozitivaj bakterioj]] Les [[bactérie]]s à ''Gram positif'' sont mises en évidence par une technique de coloration appelée [[coloration de Gram]]. Les bactéries à ''Gram positif'' apparaissent alors mauves au [[microscope]]. La technique de coloration repose sur les caractéristiques [[membrane (biologie)|membranaires]] et de [[paroi bactérienne|paroi]] de la bactérie. La coloration au Gram est un facteur déterminant dans la [[taxinomie]] (classification) bactérienne.[[Image:Bacillus subtilis Gram.jpg|rigth|thumb|Des bactéries Gram + (Bacillus subtillis). ]] == Principe de coloration des Gram positif == Après fixation des [[bactérie]]s sur une lame (deux méthodes possibles : fixation à l'[[éthanol]] à 90° ou par passage de la lame dans la flamme) : * La lame est plongée dans un premier colorant : le ''[[violet de gentiane]]'' (ou un produit proche, le [[cristal violet]]). Le violet de gentiane est un colorant puissant ([[toxique]] et [[cancérigène]]). Il va traverser les [[paroi bactérienne|parois]] et [[membrane (biologie)|membranes]] des bactéries et se fixer dans leurs [[cytoplasme]]s. Ainsi à cette étape toutes les [[Cellule (biologie)|cellules]] sont colorées en violet. * La lame est ensuite traitée au lugol iodo-ioduré en solution qui sert de ''mordant'' : il va ''renforcer'' le violet de gentiane contenu dans le [[cytoplasme]] des bactéries. * On chasse ensuite le violet avec une solution d'[[éthanol]] à 90°. Cette étape est cruciale car elle détermine quelle bactérie est ''[[Gram négatif]]'' et quelle bactérie est ''Gram positif''. Le principe est le suivant : les bactéries ''Gram positif'' possèdent une paroi riche en [[peptidoglycane]], composant qui empêche l'alcool d'emporter le violet de gentiane celui-ci restant dans le cytoplasme. La bactérie n’est donc pas décolorée (pour plus d'information, voir ci-dessous la section ''[[Gram positif#Caractéristiques des bactéries Gram positif|Caractéristiques des bactéries Gram-positif]]''). * La lame après avoir été rincée est plongée brièvement dans un deuxième colorant, la ''[[fuchsine]]''. Toutes les bactéries colorées en violet sont dites '''''"GRAM +"''''' et celles colorées en rose sont '''''"GRAM -"''''' La lame est ensuite récupérée, rincée et séchée, puis observée au [[microscope]] optique généralement à l'objectif x100 + huile à immersion. Les bactéries ''Gram positif'' apparaîtront en violet. L'observation de leurs couleurs est généralement accompagnée de descriptions structurelles (ex. [[bacille (forme)|bacille]] ou [[Coque (forme)|coque]]). == Caractéristiques des bactéries Gram positif == === Description de l'enveloppe === Les bactéries ''Gram positif'' ont une structure qui s'organise en trois grandes parties : (de l'extérieur vers l'intérieur) * La couche de [[peptidoglycane]] * L'espace périplasmique * La membrane plasmique La couche de [[peptidoglycane]] des bactéries à ''Gram positif'' est très épaisse contrairement à celle des bactéries à [[Gram négatif]], Sa composition varie très légèrement en fonction du genre voire de l’espèce de la bactérie concernée. Elle est principalement formée de plusieurs couches de polymère de [[N-acétyl-glucosamine]] (NAG) et d'[[acide N-acétylmuramique]] (NAM) en série alternée. Le peptidoglycane des ''Gram positif'' est traversé latéralement par de grande chaînes polymérique qui le relie à la membrane plasmique : les acides lipotéichoïques. D’autre chaînes comme les acides téichoïques sont contenus dans le peptidoglycane et assurent sa ''stabilité''. L'espace périplasmique, beaucoup plus étroit que chez les [[Gram négatif]], est un espace de stockage d'[[enzyme]]s, de [[nutriment]]s, de [[protéine]]s, d’[[ion]]s... Il a beaucoup d'autres fonctions notamment dans certaines étapes de la [[synthèse]] de protéine et dans le [[métabolisme]]. Il se situe entre la couche de [[peptidoglycane]] et la membrane plasmique. La membrane possède des protéines poreuses aboutissant dans l'espace périplasmique ([[synthèse]] de protéine). La membrane plasmique contient de nombreux autres complexes protéiques d'une importance vitale pour la bactérie (comme l'[[Adénosine triphosphate|ATP]] ''synthase'') qui ont des rôles prépondérants dans le métabolisme bactérien. === Description des souches === Les bactéries ''Gram positif'' sont pour la plupart des germes non exigeants, c'est-à-dire qu'ils se cultivent facilement dans les milieux de base. La plupart des [[cocci|coques]] sont des ''Grams positif'' mais de nombreux [[bacille (forme)|bacilles]] sont aussi des Gram positif. == Exemples de bactéries Gram positif == * Genre ''[[Staphylococcus]]'' ; * Genre ''[[Micrococcus]]'' ; * Genre ''[[Lactococcus]]'' ; * Genre ''[[Lactobacillus]]'' ; * Genre ''[[Clostridium]]'' ; * Genre ''[[Bacillus]]'' ; * Genre ''[[Streptococcus]]'' * Genre ''[[Enterococcus]]'' * Genre ''[[Listeria]]'' La discrimination entre les bactéries à Gram positif se fait par la recherche de la [[catalase]]. == La recherche de la catalase == === Réalisation === Sur une lame microscopique propre, déposer une goutte d'eau oxygénée (ou [[peroxyde d'hydrogène]] H<sub>2</sub>O<sub>2</sub>). Prélever sur un milieu [[gélose|gélosé]], la colonie à tester au moyen d'une [[pipette Pasteur]] stérile ou d'un ensemenceur métallique et déposer la colonie dans la goutte. === Observations et conclusions === Si on observe un dégagement gazeux ([[dioxygène]]), on dit que le résultat est positif, la souche est catalase +. Si on n'observe aucun dégagement gazeux, on dit que le résultat est négatif, le souche est catalase -. == Voir aussi == === Articles connexes === * [[Gram négatif]]. * Les [[levure]]s : apparaissent violet à la coloration de Gram mais on ne peut pas dire pour autant qu'ils soient ''Gram positif'' car ils n’ont pas du tout les mêmes caractéristiques d’enveloppe. * Les [[mycobactérie]]s constituent une exception, car elles ne sont pas colorables par la coloration de Gram : on les désigne comme [[Mycobacteriaceae|acido-alcoolo-résistantes]]. Voir [[coloration de Ziehl-Neelsen]]. {{Portail microbiologie}} [[Catégorie:Bactériologie]] [[Catégorie:Coloration histologique|Gram]] [[Catégorie:Gram positif|*]] [[ar:جراثيم موجبة الغرام]] [[br:Gram-Ya]] [[ca:Grampositiu]] [[cs:Grampozitivní bakterie]] [[en:Gram-positive bacteria]] [[eo:Gram-pozitivaj bakterioj]] [[es:Bacteria Gram positiva]] [[fi:Grampositiivinen bakteeri]] [[ga:Gradhearfach]] [[id:Gram-positif]] [[ja:グラム陽性菌]] [[nl:Gram-positieve bacteriën]] [[no:Gram-positiv bakterie]] [[pl:Bakterie Gram-dodatnie]] [[ru:Грамположительные бактерии]] [[sl:Grampozitivna bakterija]] [[tr:Gram-pozitif]] [[uk:Грам-позитивні бактерії]] [[zh:革蘭氏陽性菌]]