Hybridation de l'ADN 226101 29286153 2008-05-05T14:25:11Z Arielline 388410 /* Applications */ {{ébauche|biologie}} L''''hybridation de l’ADN''' est une technique de [[génie génétique]]. C’est une technique particulière d’[[hybridation moléculaire]] qui permet de déterminer la ressemblance entre les séquences de deux brins d’[[Acide désoxyribonucléique|ADN]] que l’on veut comparer. Elle est employée par exemple sur l’ADN d’un [[gène homologue]] ([[cytochrome b]], etc.) ou sur l’[[ADN mitochondrial]] prélevé chez des individus, d’au moins trois espèces, dont on veut connaître le degré de parenté. == Principes == Les deux chaînes d’une molécule d’ADN sont complémentaires selon la règle de [[Erwin Chargaff|Chargaff]], des liaisons de faible énergie ([[liaison hydrogène]]) s’établissant entre leurs [[base azotée|bases azotées]]. === Dénaturation de l'ADN === {{Article détaillé|Dénaturation de l'ADN}} Dans un premier temps, il faut [[Dénaturation de l'ADN|dénaturer les différentes molécules d’ADN]]. Un chauffage entre 50°C et 80°C provoque la rupture des liaisons hydrogène et donc la séparation des deux chaînes complémentaires. === Formation d’un hétéroduplex === Ensuite deux brins monocaténaires issus de 2 ADN différents sont mis en contact, en présence d’[[enzyme]]s spécifiques ([[ADN polymérase]]). La molécule bicaténaire obtenue ([[hétéroduplex]]) possède une plus ou moins grande proportion de bases complémentaires qui établissent, entre elles, de nouvelles liaisons hydrogène. === Dénaturation des hétéroduplex === Dans un dernier temps, les différents hétéroduplex sont chauffés. La température à laquelle 50 % des liaisons hydrogène sont rompues est mesurée et comparée à celle de la molécule naturelle (ADN [[témoin (science)|témoin]]). Il y a proportionnalité entre l'écart entre ces deux températures et le nombre des liaisons établies lors de l’hybridation. Plus la température de dénaturation est élevée (proche de celle de la molécule d’ADN témoin), plus la similarité entre bases complémentaires est grande et donc les espèces proches. Il peut s'agir d'appariement de sondes, d'amorces en [[Polymerase Chain Reaction|PCR]] dans un [[thermocycleur]]. == Applications == Cette technique permet de déterminer le lien de parenté entre des espèces ([[Phylogénie]]) ; par exemple : * La classification des oiseaux de [[Charles Sibley|Sibley]] et [[Burt Monroe|Monroe]] ; * les places respectives d’''[[Homo neanderthalensis]]'' et d’''[[Homo sapiens]]''. == Voir aussi == === Articles connexes === * [[Analyse de l'ADN]] * [[Réaction en chaîne par polymérase]] * [[Hybridation]] * [[Modification génétique]] * [[Transgénèse]] {{Portail Biologie cellulaire et moléculaire}} [[Catégorie:Biologie moléculaire]] [[en:DNA-DNA hybridization]] [[ja:DNA-DNA分子交雑法]] [[nl:DNA-hybridisatie]] [[sv:DNA-DNA-hybridisering]] [[tr:DNA-DNA hibridizasyon]]