Hybridation in situ 1304676 26393746 2008-02-17T09:49:36Z June Lemon 356660 {{Voir homonymes|Hybridation|In situ}} L''''Hybridation In Situ''' (HIS) est une technique de laboratoire pour localiser une séquence de nucléotides connue mono-brin ([[Acide ribonucléique|ARN]] ou [[Acide désoxyribonucléique|ADN]]) sur une [[coupe histologique]] de tissu. Cette technique repose sur la complémentarité des [[bases azotées]] entre elles (en effet, si l'on place dans un même milieu deux mono-brins complémentaires, ils vont naturellement se rapprocher pour former une hélice). Ainsi, pour pouvoir localiser une molécule d'ADN ou ARN, on doit: # la dénaturer en la chauffant (la séquence double brin (en hélice) devient mono-brin) # choisir une sonde complémentaire de la séquence cible # marquer la sonde (pour qu'on puisse la repérer et la visualiser). =Marquage de la sonde= On peut marquer la sonde grâce à : *des isotopes radioactifs comme le [[tritium]] H³, P<sup>32</sup> ou S<sup>35</sup> qu'on peut révéler par [[autoradiographie]] *des produits fluorescents (on parle alors d'[[hybridation fluorescente in situ]] (FISH)), qu'on révèle grâce à la [[microscopie à fluorescence]] *des [[haptène]]s, [[Vitamine B8|biotine]] ou dioxygénine, qu'on peut révéler avec de l'avidine ou de la streptavidine, ou encore avec des [[anticorps]] marqués par une [[enzyme]] *des [[enzyme]]s, qu'on révèle à l'aide d'[[anticorps]]. L'HIS est également réalisable en microscopie électronique en utilisant un marquage à l'or colloïdal avec plusieurs tailles de grains possibles (0.8 à 20 nm). ==Article connexe== * [[Hybridation fluorescente in situ]] [[Catégorie:Technique de laboratoire]] [[de:In-situ-Hybridisierung]] [[en:In situ hybridization]] [[he:היברידיזציה In situ]] [[ja:In situ ハイブリダイゼーション]] [[lt:Chromosomų dažymas]] [[sv:In situ-hybridisering]] [[zh:熒光原位雜交]]