Urée-tryptophane
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27303606
2008-03-12T16:30:30Z
90.49.225.104
/* Hydrolyse de l'urée */
Le milieu [[Urée-tryptophane]], improprement appelé urée-indole est un milieu de culture synthétique utilisé en [[bactériologie]] permettant la mise en évidence simultanée :
* De la production d'[[indole]] (par l'hydrolyse du [[tryptophane]] par la [[tryptophanase]]) ;
* De l'hydrolyse de l'[[urée]] (par une [[uréase]]) ;
* La désamination du tryptophane par la [[tryptophane désaminase]].
===Composition===
- L-[[tryptophane]] ............................... 3 g
- [[Urée]] ........................................ 20 g
- Monophydrogénophosphate de potassium ........ 1 g
- Dihydrogénophosphate de potassium ........... 1 g
- [[Chlorure de sodium]] .......................... 5 g
- [[Éthanol]] à 95 °GL ............................ 10 ml
- [[Rouge de phénol]] ............................. 25 mg
- [[Eau]] distillée (qsp) ......................... 1 l
===Préparation===
[[Image:Urée tryptophane.JPG|thumb|300px|resultats possibles]]
à stériliser par filtration (utiliser de l'eau stérile pour limiter la contamination initiale).
===Lecture===
*A uréase -
*B uréase +
*C indole +
*D indole -
*E TDA +
*milieu rouge (basique) : uréase +
*milieu orange ou jaune : uréase -
*après addition de [[réactif de Kovacs]] : anneau rouge (indole +), anneau jaune (indole -)
*après addition de chlorure de fer III : marron (TDA +), jaune (TDA -)
===Production d'indole===
La réaction d'hydrolyse du [[tryptophane]], catalysée par la [[tryptophanase]], produit de l'[[indole]], de l'[[pyruvate|acide pyruvique]] et de l'[[ammoniac]] selon l'équation suivante :
[[Image:Tryptophanase.png|700px|center]]
L'[[indole]] produit est mis en évidence par le [[réactif de Kovacs]]. Le diméthylamino-4-benzaldéhyde réagit avec l'[[indole]] avec formation d'un composé rouge.
===Hydrolyse de l'urée===
Elle est catalysée par l'[[uréase]], il y a production de dioxyde de carbone et d'ammoniac. Ce dernier alcalinise le milieu. Cette alcalinisation du milieu est mise en évidence par le virage du rouge de phénol au rose.
<math>H_{2}N - CO - NH_{2} + H_{2}O \longrightarrow \vec{CO_{2}} + \vec2{NH_{3}}</math>
===Désaminsation du tryptophane===
Consulter l'article à propos de la [[tryptophane désaminase]].
L'acide indole-pyruvique est mis en évidence par sa [[complexe|complexation]] en un composé marron foncé en présence d'ions [[fer]] III (ferriques, <math>Fe^{3+}</math>).
[[Catégorie:Milieu de culture]]
[[Catégorie:Bactériologie]]