Urée-tryptophane 605475 27303606 2008-03-12T16:30:30Z 90.49.225.104 /* Hydrolyse de l'urée */ Le milieu [[Urée-tryptophane]], improprement appelé urée-indole est un milieu de culture synthétique utilisé en [[bactériologie]] permettant la mise en évidence simultanée : * De la production d'[[indole]] (par l'hydrolyse du [[tryptophane]] par la [[tryptophanase]]) ; * De l'hydrolyse de l'[[urée]] (par une [[uréase]]) ; * La désamination du tryptophane par la [[tryptophane désaminase]]. ===Composition=== - L-[[tryptophane]] ............................... 3 g - [[Urée]] ........................................ 20 g - Monophydrogénophosphate de potassium ........ 1 g - Dihydrogénophosphate de potassium ........... 1 g - [[Chlorure de sodium]] .......................... 5 g - [[Éthanol]] à 95 °GL ............................ 10 ml - [[Rouge de phénol]] ............................. 25 mg - [[Eau]] distillée (qsp) ......................... 1 l ===Préparation=== [[Image:Urée tryptophane.JPG|thumb|300px|resultats possibles]] à stériliser par filtration (utiliser de l'eau stérile pour limiter la contamination initiale). ===Lecture=== *A uréase - *B uréase + *C indole + *D indole - *E TDA + *milieu rouge (basique) : uréase + *milieu orange ou jaune : uréase - *après addition de [[réactif de Kovacs]] : anneau rouge (indole +), anneau jaune (indole -) *après addition de chlorure de fer III : marron (TDA +), jaune (TDA -) ===Production d'indole=== La réaction d'hydrolyse du [[tryptophane]], catalysée par la [[tryptophanase]], produit de l'[[indole]], de l'[[pyruvate|acide pyruvique]] et de l'[[ammoniac]] selon l'équation suivante : [[Image:Tryptophanase.png|700px|center]] L'[[indole]] produit est mis en évidence par le [[réactif de Kovacs]]. Le diméthylamino-4-benzaldéhyde réagit avec l'[[indole]] avec formation d'un composé rouge. ===Hydrolyse de l'urée=== Elle est catalysée par l'[[uréase]], il y a production de dioxyde de carbone et d'ammoniac. Ce dernier alcalinise le milieu. Cette alcalinisation du milieu est mise en évidence par le virage du rouge de phénol au rose. <math>H_{2}N - CO - NH_{2} + H_{2}O \longrightarrow \vec{CO_{2}} + \vec2{NH_{3}}</math> ===Désaminsation du tryptophane=== Consulter l'article à propos de la [[tryptophane désaminase]]. L'acide indole-pyruvique est mis en évidence par sa [[complexe|complexation]] en un composé marron foncé en présence d'ions [[fer]] III (ferriques, <math>Fe^{3+}</math>). [[Catégorie:Milieu de culture]] [[Catégorie:Bactériologie]]